Utilização de diferentes volumes de sêmen na realização do teste hiposmótico em touros adultos da raça nelore / Use of different semen volumes in hypoosmotic test of adult nelore bulls / El uso de diferentes volúmenes de semen en el test hiposmótico en toros adultos de la raza nelore

O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes proporções de sêmen: solução hiposmótica na realização do teste hiposmótico e suas relações com a congelabilidade do sêmen de touros zebuínos. Utilizaram-se 15 ejaculados de três touros adultos da raça Nelore. No sêmen in natura realizou-se a avaliação física e morfológica, a coloração supravital e o teste hiposmótico. No teste hiposmótico foi utilizada uma solução com osmolaridade de 100 mOsm/Kg com 15 minutos de período de incubação a 37 ºC, tanto no sêmen in natura quanto no congelado/descongelado. Foram utilizados quatro volumes de sêmen em 1mL de solução hiposmótica: 10, 20, 50 e 100 µL. As amostras criopreservadas foram descongeladas e foram realizados os testes hiposmótico, coloração supravital, teste de termo-resistência lento e a coloração fluorescente. Os valores médios e desvios padrão do percentual de espermatozoides reativos ao teste hiposmótico em sêmen in natura e congelado/descongelado foram 69,3 ± 11,8 e 20,5 ± 6,8; respectivamente. Não houve correlação do teste hiposmótico com os aspectos físicos e morfológicos e os testes complementares realizados em sêmen in natura e congelado/descongelado. Nenhum teste de integridade de membrana plasmática dos espermatozoides foi capaz de classificar os touros quanto a sua congelabilidade do sêmen. Conclui-se que o teste hiposmótico pode ser realizado com 20 a 100 µL de sêmen in natura, e 10 a 100 µL de sêmen congelado/descongelado em 1 mL de solução hiposmótica, sem interferir em seus resultados, mas deve-se optar por 100 µL tanto para sêmen in natura e congelado/descongelado, porque melhora consideravelmente a leitura das lâminas.(AU)

The objective of this study was to evaluate different proportions of semen: hypoosmotic solution in the hypoosmotic swelling test and their relationship with semen freezability in Zebu bulls. A total of 15 ejaculates from three adult Nelore bulls were used. Physical and morphological features were analyzed in fresh semen, as well as supravital staining and hypoosmotic swelling test. In the hypoosmotic test, a hypoosmotic solution with 100 mOsm/kg osmolality using 15 minutes incubation at 37 °C was used both in fresh and frozen/thawed semen. Four semen volumes in 1-ml hyposmotic solution were used: 10, 20, 50 and 100 µL. Cryopreserved samples were thawed and submitted to hypoosmotic tests, supravital staining, slow thermo-resistance test and fluorescent staining. Mean values and standard deviations of the percentage of reactive sperm cells in the hypoosmotic test in fresh and frozen/thawed semen were 69.3 ± 11.8 and 20.5 ± 6.8, respectively. There was no correlation between the hypoosmotic test and physical and morphological features and the complementary tests performed on fresh and frozen/thawed semen. None of the plasma membrane integrity tests was able to predict bull semen freezability. It can be concluded that the hypoosmotic test can be performed with 20 to 100 µL fresh semen, and 10 to 100 µL of frozen/thawed semen in 1 mL of hypoosmotic solution without interfering with their results, but 100 µL should be used in both, because it considerably improves the view of the slides.(AU)

El objetivo de este estudio ha sido evaluar diferentes proporciones de semen: solución hiposmótica en la realización del test hiposmótico y sus relaciones con la congelabilidad del semen de toros cebú. Se utilizaron 15 eyaculados de tres toros adultos de la raza Nelore. En el semen fresco se realizó evaluación física y morfológica, la tinción supravital y test hiposmótico. En el test hiposmótico se ha utilizado una solución con osmolaridad de 100 mOsm/kg con un período de incubación de 15 minutos a 37 ºC, tanto en el semen fresco cuanto en el congelado/descongelado. Fueron utilizados cuatro volúmenes de 1 mL de solución hiposmótica: 10, 20, 50, y 100 µL. Las muestras criopreservadas fueron descongeladas y realizados los tests hiposmótico, tinción supravital, test de resistencia al fuego lento y la tinción fluorescente. Los valores medios y desvío estándar del porcentaje de espermatozoides reactivos al test hiposmótico en l semen fresco y congelado/descongelado fueron 69,3 ± 11,8 y 20,5 ± 6,8; respectivamente. No hubo correlación del test hiposmótico con las características físicas y morfológicas y pruebas adicionales en el semen fresco y congelado/descongelado. Ningún test de integridad de la membrana plasmática de los espermatozoides han sido capaz de clasificar a los toros cuanto su congelabilidad del semen. Se puede concluir que el test hiposmótico puede ser realizado con 20 a 100 µL de semen fresco, y de 10 a 100 µL de semen congelado/descongelado en 1 mL de solución hiposmótica, sin interferir en sus resultados, pero se debe optar por 100 µL para el semen fresco y congelado/descongelado, porque mejora significativamente la lectura de las láminas.(AU)

Concentração de anticoagulante, tempo e temperatura de armazenagem sobre os parâmetros hematológicos no hemograma automatizado / Anticoagulant concentration, time and storage temperature on hematological parameters in automated blood count

O estudo teve como objetivo identificar os efeitos do tempo de estocagem, da temperatura de armazenamento e da quantidade de anticoagulante sobre parâmetros hematológicos de cães. Foram utilizadas amostras do sangue de dez cães de raças variadas, clinicamente hígidos. As alíquotas foram colhidas com 1,8mg; 3,6mg; 7,2mg e 14,4mg de ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) por mL de sangue, distribuídas em dois grupos: de 2°C a 8°C e temperatura ambiente. Após a coleta, foram avaliadas em quatro tempos: 0, 12, 24 e 48 horas. Usando um contador automático de células, foram avaliados leucócitos, eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio (VCM), índice de anisocitose eritrocitária (RDW), plaquetas e plaquetócrito (PCT). O valor do VCM diminuiu nas maiores concentrações de EDTA (7,2mg mL-1 e 14,4mg mL-1), com decréscimo de 2,36 por cento na maior concentração. A temperatura e o tempo de armazenagem também ocasionaram alteração nesse parâmetro, ou seja, houve decréscimo no tempo 12 horas à temperatura de 2 a 8°C e aumento nos tempos 24 e 48 horas à temperatura ambiente (P<0,05). A temperatura de conservação influenciou discretamente a contagem de leucócitos e eritrócitos, que apresentaram valores menores na temperatura ambiente. Hemoglobina, hematócrito, plaquetas e PCT não apresentaram alteração significativa. As alterações observadas não comprometeram os resultados obtidos no contador automático, mostrando que as amostras sanguíneas, conservadas por 48 horas, mantiveram-se em boas condições para análise, principalmente quando armazenadas à temperatura de 2 a 8°C.

The study aimed to identify the effects of time, temperature of storage and excess of anticoagulant on hematological parameters of dogs. Blood samples of ten, clinically healthy dogs, of different breeds were utilized. Aliquots were stored with 1.8mg, 3.6mg, 7.2mg and 14.4mg of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) per mL of blood, divided into two groups: 2°C to 8°C and room temperature. Right after collection, they were evaluated in four times: 0h, 12h, 24h and 48h. White blood cells, red blood cells, hemoglobin, packed cell volume (PCV), mean corpuscular volume (MCV), red cell distribution width (RDW), platelet and thrombocrit (PCT) were evaluated in the automatic cell counter. In the automatic cell counter analysis, the MCV increased significantly with higher concentrations of EDTA (7.2mg mL-1 and 14.4mg mL-1) peaking at 2.36 percent, in the highest concentration. Temperature and time also influenced the MCV, which showed a decrease in time 12 under temperature of 2°C to 8°C and an increase in time 24 and 48 at room temperature. Storage temperature influenced leukocytes and erythrocytes counts, which showed lower values at room temperature. Hemoglobin, PCV, platelet and PCT did not change significantly. The changes observed did not compromise the results obtained by automatic cell counter, showing that blood samples stored for two days remained in good condition for processing, especially when stored under refrigeration.

Alguns aspectos biométricos do aparelho genital externo de jumentos doadores de sêmen da raça Pêga / Some biometric aspects of the external genital tract from donkey Pêga breed semen donors

O presente estudo foi conduzido com seis jumentos reprodutores da raça Pêga, com peso médio de 272±34,9 (231-326kg), sendo subdivididos em adultos (J1, J2 e J3, média 15 anos) e jovens (J4, J5 e J6, média 3,5 anos). Os reprodutores apresentavam histórico normal de fertilidade à monta natural e, após realização de exame andrológico, foram classificados como aptos à reprodução. Foram realizadas 180 coletas de sêmen. Os reprodutores apresentaram parâmetros seminais considerados normais para a espécie. De agosto/2006 a fevereiro/2007, após a realização do exame andrológico, cada reprodutor foi submetido a três ou quatro mensurações do aparelho genital externo para: comprimento testicular (CT - crânio caudal), altura testicular (AT - dorso ventral), largura testicular (LT - médio lateral) e espessura do funículo (FUN - terço médio). Os dados de biometria testicular foram utilizados para o cálculo do índice testicular (IT) e volume testicular (VT). O IT médio observado foi de 7,4 (5,9 a 9,6), e o VT esquerdo foi de 155,5±14,4mL, enquanto o direito foi de 149,3±14,9. A medida de FUND foi de 25,3±3,3mm (20,3a 30,8mm), e de FUNE foi 24,6±1,5mm (22 a 26mm). Jumentos, mesmo com IT menor do que o proposto para garanhões; se apresentaram mais eficientes que os últimos para a produção espermática. O volume espermático, associado ao IT, pode ser usado como ferramenta auxiliar na estimativa da constatação de normalidade para testículos de jumentos. A mensuração in vivo do funículo espermático pode ser uma nova variante na utilização do exame andrológico de jumentos. Os dados descritos podem servir de valores de referência e valores práticos quanto à biometria do aparelho genital externo de jumentos.

The present study was performed with six Pêga breed donkeys, weight from 231 to 326kg (272±34.9). The breeders were divided into the adult group (J1, J2 e J3, 15 years old average) and the young group (J4, J5 e J6, 3.5 years old average). . The donkeys presented normal rates of fertility at natural mating. After breeding soundness evaluation all animals were considered capable for reproduction. A hundred eight semen collections were realized, and the donkeys presented normal seminal parameters for the specie. From August/2006 to February/2007, after semen collection each donkey was submitted to three or four measurements of the extern genital tract (both right and left side) for: testis length (LT - cranio caudal); testis height (TH - dorso ventral) and thickness of spermatic funiculum (FUN - third part). The biometric data from biometric testis were used to calculate the testis indices (TI) and testis volume (TV). The TI observed was 7.4 (5.9 a 9.6) and TV was 155.5±14.4, 149.3±14.9 respectively left and right. The average FUN was 25.3±3.3mm (20.3 a 30.8mm) to the right and 24.6±1.5mm (22 a 26mm) to the left side. The donkeys presented lesser TI than those proposed for the stallions, but the asinine were more efficient for sperm production than the average reported to stallions . The testis volume associated with IT can be used as an additional tool to estimate the normality of the breeder's testis. The measurement in vivo of spermatic funiculum can be used as a new component for the breeding soundness evaluation of donkeys. The genital extern tract biometric values can support routine breeding evaluation and can be applied to news studies.

Hidratação enteral em equinos: solução eletrolítica associada ou não à glicose, à maltodextrina e ao sulfato de magnésio: resultados de laboratório / Enteral fluid therapy in horses: electrolyte solution associated or not with glucose, maltodextrine and magnesium sulphate: laboratory results

No presente estudo, foram avaliados os efeitos de soluções eletrolíticas administradas via sonda nasoesofágica de pequeno calibre sobre o hematócrito, o volume plasmático e as concentrações plasmáticas de proteínas totais, sódio, potássio, cloreto, magnésio total e cálcio iônico de eqüinos hígidos e desidratados experimentalmente. Foram utilizados quatro equinos adultos, mestiços, dois machos e duas fêmeas. No experimento 1 (E1Des), os animais foram desidratados experimentalmente, enquanto no 2 (E2Hig) foram utilizados equinos hígidos. Os animais foram submetidos a cada um dos seguintes tratamentos: SE - solução eletrolítica isotônica; SEGli - solução eletrolítica isotônica + glicose; SEMalt - solução eletrolítica isotônica + maltodextrina e SEMg - solução eletrolítica isotônica + sulfato de magnésio. A solução eletrolítica foi administrada na dose de 15mL kg-1 h-1, durante 12h via sonda nasoesofágica por fluxo contínuo. Os tratamentos com as soluções eletrolíticas ocasionaram expansão do volume plasmático, ocasionando a redução nos valores das proteínas plasmáticas totais e do hematócrito, enquanto os valores dos eletrólitos avaliados permaneceram na faixa de referência.

In the present study, the effects of four different electrolyte solutions on the packed cell volume (PCV), plasma volume and plasma concentrations of total protein, sodium, potassium, chloride, total magnesium, and ionized calcium in healthy and experimentally dehydrated horses were evaluated. Four crossbred horses, two males and two females were used. In experiment 1 (E1Des) the animals were experimentally dehydrated, while in the second experiment (E2Hig) healthy equines were used. In both experiments the animals were subjected to the following treatments: SE - isotonic electrolyte solution; SEGlu - glucose-enriched SE; SEMalt - maltodextrine-enriched SE and SEMg - magnesium sulphate-enriched SE. The electrolyte solutions used in all treatments were administered at 15mL kg-1 h-1 during 12h through small-bore nasoesophagus tube by continuous flow. The treatments with the electrolyte solutions resulted in an increase of plasma volume and a decrease in total plasma protein, hematocrit, while the electrolytes remained within the reference values.

Expression profile of genes associated with mastitis in dairy cattle

In order to characterize the expression of genes associated with immune response mechanisms to mastitis, we quantified the relative expression of the IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ and TNF-α genes in milk cells of healthy cows and cows with clinical mastitis. Total RNA was extracted from milk cells of six Black and White Holstein (BW) cows and six Gyr cows, including three animals with and three without mastitis per breed. Gene expression was analyzed by real-time PCR. IL-10 gene expression was higher in the group of BW and Gyr cows with mastitis compared to animals free of infection from both breeds (p < 0.05). It was also higher in BW Holstein animals with clinical mastitis (p < 0.001), but it was not significant when Gyr cows with and without mastitis were compared (0.05 < p < 0.10). Among healthy cows, BW Holstein animals tended to present a higher expression of all genes studied, with a significant difference for the IL-2 and IFN-γ genes (p < 0.001). For animals with mastitis no significant difference in gene expression was observed between the two breeds. These findings suggest that animals with mastitis develop a preferentially cell-mediated immune response. Further studies including larger samples are necessary to better characterize the gene expression profile in cows with mastitis.